可見分光光度計(jì)是一種結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)潔、使用方便的單光束分光光度計(jì),基于樣品對(duì)單色光的選擇吸收特性可用于對(duì)樣品進(jìn)行定性和定量分析。
其定量分析根據(jù)相對(duì)測(cè)量原理工作,即選定樣品的溶劑(或空氣 )作為標(biāo)準(zhǔn)試樣,設(shè)定其透射比為100%,被測(cè)樣品的透射比則相對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)試樣(或空氣)而得到。
當(dāng)一束單色光照射待測(cè)物質(zhì)的溶液時(shí),當(dāng)某一定頻率(或波長(zhǎng))的可見光所具有的能量(hf)恰好與待測(cè)物質(zhì)分子中的價(jià)電子的能級(jí)差相適應(yīng)(即ΔE=E2-E1=hf)時(shí),待測(cè)物將對(duì)該頻率(波長(zhǎng))的可見光產(chǎn)生選擇性的吸收。用可見分光光度計(jì)可以測(cè)量和記錄其吸收程度(吸光度)。
由于在一定條件下,吸光度A與待測(cè)物質(zhì)的濃度C及吸收地長(zhǎng)度l的乘積成正比,即A= KCL,所以,在測(cè)得吸光度 A后,可采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法、比較法以及標(biāo)準(zhǔn)加入法等方法進(jìn)行定量分析。
下面讓我們一起來了解一下可見分光光度計(jì)的使用方法吧
(1)開機(jī)預(yù)熱
儀器接通電源,微機(jī)進(jìn)行系統(tǒng)自檢,LCD顯示窗口顯示相應(yīng)的產(chǎn)品型號(hào)后,儀器進(jìn)入工作狀態(tài)。默認(rèn)的工作模式是T 。
注意:為使內(nèi)部達(dá)到熱平衡,開機(jī)預(yù)熱時(shí)間不小于30 分鐘。
(2)改變波長(zhǎng)
通過旋轉(zhuǎn)波長(zhǎng)手輪改變波長(zhǎng),并在波長(zhǎng)觀察窗的刻度選擇所需的波長(zhǎng)。
(3)放置參比與待測(cè)樣品
選擇測(cè)試用的比色皿,把盛放參比和待測(cè)液的樣品放入樣品架內(nèi),通過樣品架拉桿來選擇樣品的位置。當(dāng)拉桿到位時(shí)有定位感,到位時(shí)輕輕推拉一下以保證定位的正確。
(4)調(diào)0%T、調(diào)100%T/0A
為保證儀器進(jìn)入正確的測(cè)試狀態(tài),在儀器改變測(cè)試波長(zhǎng)和測(cè)試一段時(shí)間后可通過按0%鍵和100%/0A鍵對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)零和調(diào)滿度、吸光度。
(5)顯示方式的選擇
a. T 透射比
b. A 吸光度
c. C 濃度
d. F濃度因子